2019_20
Guía docente 
Facultad de Enología
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castellano 
Grado en Biotecnología (2009)
 Asignaturas
  TECNOLOGÍA DEL ADN RECOMBINANTE
   Contenidos
tema Subtema
1. Introducción. Introducción a la ingeniería genética, conceptos básicos de clonación. DNA recombinante; vectores y herramientas; incorporación de ADN al huésped, técnicas básicas (PCR, electroforesis ...).
2. Vectores para procariotas: Plásmidos y bacteriófagos. Características básicas de los vectores plásmidos y bacteriófagos. Selección. Mejora de los vectores básicos. Plásmidos pBR322 y puC. Vectores derivados del fago lambda de inserción y de sustitución. Vectores avanzados. Aplicaciones: Phage Display.
3. Manipulación del DNA. Purificación del DNA. Corte y unión: enzimas de restricción, ligasas, otras enzimas usados en ingeniería genética.
4. Introducción del DNA en el huésped y selección de recombinantes. Transformación por métodos químicos y físicos, método del cloruro de calcio, electroporación. Virus. Identificación de los organismos transformados.
5. Librerías génicas. Construcción de genotecas.
6. Clonación en levaduras. Clonación en S. cerevisiae. Vectores: vectores de integración cromosómica (Yip) y vectores de replicación autónoma (Yep, YRp, YCp, YAC). Introducción de ADN en levaduras. Expresión de proteínas recombinantes. Yeast cell surface display. Aplicaciones: Yeast Two Hybrid, Yeast Three Hybrid.
7. Ingeniería genética en células animales Transfección transitoria y estable. Estrategias de transfección. Métodos de selección. Vectores: plásmidos no replicativos, plásmidos con replicones víricos, vectores víricos (retrovirus, lentivirus, adenovirus). Células empaquetadoras. Expresión de proteínas. Gene silencing por RNA de interferencia. Técnica CRISPR / CAS9.
TEMARIO PRÁCTICAS CLONACIÓN DEL GENOMA DEL BACTERIÓFAGO LAMBDA EN EL VECTOR pUC18 DE AMPLIFICACIÓN EN E. COLI