2. Vectores para procariotas: Plásmidos y bacteriófagos. |
Características básicas de los vectores plásmidos y bacteriófagos. Selección. Mejora de los vectores básicos. Plásmidos pBR322 y puC. Vectores derivados del fago lambda de inserción y de sustitución. Vectores avanzados. Aplicaciones: Phage Display. |
4. Introducción del DNA en el huésped y selección de recombinantes. |
Transformación por métodos químicos y físicos, método del cloruro de calcio, electroporación. Virus. Identificación de los organismos transformados. |
6. Clonación en levaduras. |
Clonación en S. cerevisiae. Vectores: vectores de integración cromosómica (Yip) y vectores de replicación autónoma (Yep, YRp, YCp, YAC). Introducción de ADN en levaduras. Expresión de proteínas recombinantes. Yeast cell surface display. Aplicaciones: Yeast Two Hybrid, Yeast Three Hybrid. |
7. Ingeniería genética en células animales |
Transfección transitoria y estable. Estrategias de transfección. Métodos de selección. Vectores: plásmidos no replicativos, plásmidos con replicones víricos, vectores víricos (retrovirus, lentivirus, adenovirus). Células empaquetadoras. Expresión de proteínas. Gene silencing por RNA de interferencia. Técnica CRISPR / CAS9. |
TEMARIO PRÁCTICAS |
CLONACIÓN DEL GENOMA DEL BACTERIÓFAGO LAMBDA EN EL VECTOR pUC18 DE AMPLIFICACIÓN EN E. COLI
|